Single-molecule super-resolution imaging of chromosomes and in situ haplotype visualization using Oligopaint FISH probes

Fluorescence in situ hybridization (FISH) is a powerful single-cell technique for studying nuclear structure and organization. Here we report two advances in FISH-based imaging. We first describe the in situ visualization of single-copy regions of the genome using two single-molecule super-resolution methodologies. We then introduce a robust and reliable system that harnesses single-nucleotide polymorphisms (SNPs) to visually distinguish the maternal and paternal homologous chromosomes in mammalian and insect systems. Both of these new technologies are enabled by renewable, bioinformatically designed, oligonucleotide-based Oligopaint probes, which we augment with a strategy that uses secondary oligonucleotides (oligos) to produce and enhance fluorescent signals. These advances should substantially expand the capability to query parent-of-origin-specific chromosome positioning and gene expression on a cell-by-cell basis

Le Forum, Vol. 44 #3

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Nanotools for Neuroscience and Brain Activity Mapping

Neuroscience is at a crossroads. Great effort is being invested into deciphering specific neural interactions and circuits. At the same time, there exist few general theories or principles that explain brain function. We attribute this disparity, in part, to limitations in current methodologies. Traditional neurophysiological approaches record the activities of one neuron or a few neurons at a time. Neurochemical approaches focus on single neurotransmitters. Yet, there is an increasing realization that neural circuits operate at emergent levels, where the interactions between hundreds or thousands of neurons, utilizing multiple chemical transmitters, generate functional states. Brains function at the nanoscale, so tools to study brains must ultimately operate at this scale, as well. Nanoscience and nanotechnology are poised to provide a rich toolkit of novel methods to explore brain function by enabling simultaneous measurement and manipulation of activity of thousands or even millions of neurons. We and others refer to this goal as the Brain Activity Mapping Project. In this Nano Focus, we discuss how recent developments in nanoscale analysis tools and in the design and synthesis of nanomaterials have generated optical, electrical, and chemical methods that can readily be adapted for use in neuroscience. These approaches represent exciting areas of technical development and research. Moreover, unique opportunities exist for nanoscientists, nanotechnologists, and other physical scientists and engineers to contribute to tackling the challenging problems involved in understanding the fundamentals of brain function

Features, Causes and Consequences of Splanchnic Sequestration of Amino Acid in Old Rats

RATIONALE: In elderly subjects, splanchnic extraction of amino acids (AA) increases during meals in a process known as splanchnic sequestration of amino acids (SSAA). This process potentially contributes to the age-related progressive decline in muscle mass via reduced peripheral availability of dietary AA. SSAA mechanisms are unknown but may involve an increased net utilization of ingested AA in the splanchnic area. OBJECTIVES: Using stable isotope methodology in fed adult and old rats to provide insight into age-related SSAA using three hypotheses: 1) an increase in protein synthesis in the gut and/or the liver, 2) an increase in AA oxidation related to an increased ureagenesis, and 3) Kupffer cell (KC) activation consequently to age-related low-grade inflammation. FINDINGS: Splanchnic extraction of Leu (SPELeu) was doubled in old rats compared to adult rats and was not changed after KC inactivation. No age-related effects on gut and liver protein synthesis were observed, but urea synthesis was lower in old rats and negatively correlated to liver Arg utilization. Net whole-body protein synthesis and arterial AA levels were lower in old rats and correlated negatively with SPELeu. CONCLUSION: SSAA is not the consequence of age-related alterations in ureagenesis, gut or liver protein synthesis or of KC activity. However, SSAA may be related to reduced net whole-body protein synthesis and consequently to the reduced lean body mass that occurs during aging

Corporate reputation in the spanish context: An interaction between reporting to stakeholders and industry.

ABSTRACT: The authors describe the intensity and orientation of the corporate social responsibility (CSR) reporting in four Spanish industries and explore the relationship that exists between both concepts and an independent measurement of reputation for CSR (CSRR). The results demonstrate that the CSR reporting is especially relevant and useful in the finance industry. Finance companies report significantly more CSR information than most industries in Spain, and this reporting is more closely linked to their CSRR than the CSR reporting of basic, consumer goods and services industries. Borra

Paramagnetic and fluorescent liposomes for target-specific imaging and therapy of tumor angiogenesis

Angiogenesis is essential for tumor growth and metastatic potential and for that reason considered an important target for tumor treatment. Noninvasive imaging technologies, capable of visualizing tumor angiogenesis and evaluating the efficacy of angiostatic therapies, are therefore becoming increasingly important. Among the various imaging modalities, magnetic resonance imaging (MRI) is characterized by a superb spatial resolution and anatomical soft-tissue contrast. Revolutionary advances in contrast agent chemistry have delivered versatile angiogenesis-specific molecular MRI contrast agents. In this paper, we review recent advances in the preclinical application of paramagnetic and fluorescent liposomes for noninvasive visualization of the molecular processes involved in tumor angiogenesis. This liposomal contrast agent platform can be prepared with a high payload of contrast generating material, thereby facilitating its detection, and is equipped with one or more types of targeting ligands for binding to specific molecules expressed at the angiogenic site. Multimodal liposomes endowed with contrast material for complementary imaging technologies, e.g., MRI and optical, can be exploited to gain important preclinical insights into the mechanisms of binding and accumulation at angiogenic vascular endothelium and to corroborate the in vivo findings. Interestingly, liposomes can be designed to contain angiostatic therapeutics, allowing for image-supervised drug delivery and subsequent monitoring of therapeutic efficacy

L'influence du degré d'ouverture pédagogique et du degré d'humanisme de l'enseignant sur le degré de prise en charge de l'étudiant

Le but de cette recherche est de démontrer l'influence du degré d'ouverture pédagogique et de l'humanisme de l'enseignant sur l'habileté de prise en charge des étudiants. Le modèle théorique développé à l'intérieur du premier chapitre est principalement inspiré des écrits sur la pédagogie ouverte et sur l'importance de l'humanisme dans l'enseignement. Selon Paquette, Angers, Stephens et Walberg and Thomas, la pédagogie ouverte devrait favoriser le développement de la prise en charge chez l'étudiant puisque l'organisation de la classe s'articule surtout autour du fait que l'enfant doit apprendre à fonctionner par lui-même, à être responsable, à prendre de l'initiative et à ressentir une satisfaction personnelle à apprendre. Aussi, l'enseignant qui pratique ce type de pédagogie devrait démontrer naturellement des attitudes humanistes envers le jeune. D'autres auteurs comme Rogers, Paré et St-Amand pensent que l'enseignant qui fait preuve de beaucoup d'humanisme va amener l'enfant à se prendre davantage en charge en l'aidant à avoir confiance en lui et à mieux se connaître. Sur le plan théorique, la prise en charge est comprise comme étant la motivation à accomplir un but. Pour les fins de mesures opératoires, la terminologie des trois variables a été précisée en ajoutant une notion de degré pour chacune d'elles, traitant ainsi de degré d'ouverture pédagogique, de degré d'humanisme et de degré de prise en charge. Le besoin de l'étude est senti du fait qu'aucune recherche n'a traité spécifiquement de l'effet d'une approche pédagogique sur la prise en charge des étudiants. L'effet du degré d'ouverture pédagogique et du degré d'humanisme de l'enseignant sur le degré de prise en charge de l'étudiant est mesuré en deux étapes. La première consiste à former deux groupes d'enseignants qui démontrent une différence significative quant à leur degré d'ouverture pédagogique d'une part et deux autres groupes avec une différence significative de degré d'humanisme d'autre part. La formation des groupes s'est effectuée à l'aide d'un questionnaire servant à mesurer le degré d'ouverture pédagogique de l'enseignant et son degré d'humanisme. La deuxième étape consiste à vérifier s'il existe une différence significative entre les moyennes de prise en charge des étudiants qui sont rattachés aux deux groupes enseignants pour leur degré d'ouverture pédagogique. Cette dernière procédure est répétée pour ce qui est des étudiants qui sont reliés aux deux groupes d'enseignants pour leur degré d'humanisme. Enfin, l'adéquation entre le degré d'ouverture pédagogique et le degré d'humanisme de l'enseignant est mesurée à l'aide d'un coefficient de corrélation. Les hypothèses visant à prouver l'influence positive du degré d'ouverture pédagogique et du degré d'humanisme de l'enseignant sur la prise en charge de l'étudiant n'ont pas été confirmées. Il est donc possible de croire que l'ouverture pédagogique et l'humanisme de l'enseignant ne sont pas des variables qui influencent l'habileté de prise en charge chez l'enfant. Par ailleurs, une analyse complémentaire montre que la prise en charge des étudiants augmenterait en fonction de l'âge de ces derniers. Cette constatation nous amène à considérer l'habileté de prise en charge selon une perspective développementale. Le dernier chapitre porte sur la discussion des résultats eus égard aux forces et aux faiblesses de la recherche. D'abord, les résultats obtenus doivent être interprétés en fonction de limites méthodologiques importantes. Ces limites sont liées à un manque de précision en ce qui concerne le questionnaire de l'enseignant et à un échantillonnage trop restreint. Ensuite, il faut comprendre que la non confirmation des hypothèses ne nie pas nécessairement l'influence positive d'une approche ouverte sur la prise en charge des étudiants du premier cycle. Mais il importe de savoir que la mesure de cette influence doit s'effectuer sur une étude longitudinale afin de respecter l'aspect développemental de l'habileté de prise en charge